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Del viscerótomo al microscópio

Técnica histológica es el conjunto de las operaciones que se han diseñado para transformar las células ylos tejidos en los preparativos para el examen microscópico. Estas operaciones se desarrollan en etapas sucesivas de acuerdo con principios de la técnica histológica. Conceptualizando de forma romántica, la técnica histológica es el arte de teñir tejidos y células y el histotecnico es el gran pintor que prepara sus pinturas (colores).

Durante las epidemias de fiebre amarilla que se produjeron entre los años 1930 y 1970, un trozo de hígado fue retirado con la ayuda de un viscerótomo, se colocó en fijador y se envíó a la sección de viscerotomía del Laboratorio de Fiebre Amarilla donde se realizaban todos los procedimientos histológicos requeridos para la emisión del diagnóstico.

 

Procesos involucrados en la obtención del material para análisis. (A) Ilustración artística de la ubicación del hígado en el cuerpo humano. Fuente: http://www.northarundel.com/patiented/articles/liver_000421.htm; (B) Frasco usado actualmente para el fijado del material; (C) Diseño esquemático de un viscerótomo. Fuente: http://www.northarundel.com/patiented/articles/liver_000421.htm; http://profiles.nlm.nih.gov/VV/B/B/K/Q/(D) Foto de la sección de viscerotomia del Laboratório de Fiebre Amarilla Fuente: http://profiles.nlm.nih.gov/VV/B/B/F/M/

Al llegar al laboratorio, el material se cortaba en fragmentos más pequeños (escisión), siendo que, uno de ellos seguía para procesamiento dando origen a placas para diagnóstico y otra era almacenada como reserva técnica.

Escisión: Imagen representativa de la técnica de escisión de una muestra de hígado. Reserva técnica: Foto de botellas originales de la Colección de Fiebre Amarilla que contiene reservas de materiales de casos procesados por el Laboratorio de Histopatología de la Fiebre Amarilla.

Antes de 1950 y de la llegada del procesador automático, el procesamiento del tejido se realizaba manualmente, hecho a través del cambio del material histológico del fijador para los diferentes grados de alcohol, agentes de blanqueo y parafina líquida para la impregnación de tejidos. Una vez completados estos pasos, los tejidos fueron incorporados en moldes de papel, los bloques fueron recortados en tamaños adecuados para la microtomía. El proceso duraba varios días, dependiendo de la carga de trabajo del técnico.

Imagen a la izquierda: etapas del procesamiento manual de tejidos. Imagen a la derecha: ejemplo de procesador automático utilizado actualmente em la rutina de la mayoría de los servicios de patología..

El último paso de procesamiento implica la impregnación del tejido procesado en medio rígido con parafina. Esta todavía se utiliza en forma líquida, formando un bloque de parafina con un tejido en el interior cuando la solidificación se complete, en la etapa llamada inclusión.

Procedimiento de inclusión de tejidos

Cuando el bloque está listo, se realiza entonces la Microtomiaque es el procedimiento para la obtención de láminas finas de tejido, adquiridas con la ayuda de cuchillas en un dispositivo llamado microtomo. Este equipo se ha sometido mejoras tecnológicas que permiten una sección de fragmentos de tejidos delgados (típicamente 5 micras) y semi-delgados (1 a 3 micras)..

Microtomía de tejidos embebidos en parafina

El preparado histológico después de la microtomía es incoloro, lo que requiere agudizar su observación. Para esto se emplean sustancias capaces de teñir los constituyentes de los tejidos conocidos como colorantes.Finalmente, una vez teñidos, los cortes deben ser colocados en una posición tal que su protección y conservación queden garantizadas, llamamos a este paso de sellado (o ensamblaje)

Así, el tejido está listo para ser analizado microscópicamente.

Coloración, sellado, microscopia y arcuivamiento de cortes histológicos.

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